Использование плотных сред и методов получения чистых культур в микробиологии

Первые исследователи использовали для выращивания микроорганизмов жидкие среды, например, Пастер применял для этого вытяжки. Он определил, что дрожжи, подобно растениям, содержат углерод, кислород, водород, азот и минеральные вещества (1858). Рост дрожжей и бактерий получали в растворах, содержащих дистиллированную воду, тартрат аммония, сахара и золу дрожжей. Позже стали заменять последний компонент соответствующими минеральными солями и варьировать источники углерода.

 

В 1873 г. Джозеф Листер (1827-1912) ввел в практику метод серийных разведений бактерий в жидкой среде для получения чистых культур. Выделенный таким способом штамм Streptococcus lactés, как продемонстрировал (1909) Сигурд Орла-Йенсен (1870-1949), был чистой культурой. Однако получить желаемый результат этим методом удавалось не каждому исследователю.

 

Настоящий переворот в исследованиях вызвало применение плотных сред. Плотные среды в виде природных субстратов, таких как экскременты животных, навозные шарики, срезы картофеля и моркови, использовали уже задолго до этого для выращивания грибов. В 1852 г. был впервые применен желатин как прозрачная питательная среда, необходимая для изучения жизненного цикла грибов (Ц. Виттадини). Оскар Брефельд (1839-4925) использовал этот метод для изучения гриба Empusa muscac (1868). Благодаря изобретательности Коха появились метод приготовления плотной прозрачной среды с желатином и метод выделения чистой культуры на плотной среде, разлитой в стеклянные тарелки (1881). Коху, по-видимому, помог его опыт в использовании желатина для изготовления фотопластинок.

 

Заменить желатин агаром в качестве отвердителя предложила Фанни Хессе, супруга Вальтера Хессе (1846-1911), занимавшегося определением числа микроорганизмов в воздухе (1880); именно от Хессе исходило это нововведение в лаборатории Коха (1882). Вероятно, никто из исследователей не был знаком с кулинарной книгой 1873 г. издания, рекомендовавшей применять агар-агар для приготовления желе. Позже стеклянные тарелки были заменены стеклянными чашками Петри (1887).

ddrug1.png